芽孢菌的分离培养

  芽孢菌参与许多有机物的转化及生物降解，多数为好氧或兼性厌氧微生物，菌体杆状或球状。芽孢是在菌体内形成的圆形或椭圆形的内生孢子。芽孢的代谢活力弱，对不良环境如高温、干燥、化学药品等的抵抗力强。
    分离步骤如下：
（1）将水样接种于刺激芽孢生长的培养基中，35℃培养18～24小时。将培养好的菌悬液置于80℃水浴中加热10～20分钟以杀死不能形成芽孢的菌体。
    刺激芽孢生长的培养基如下：
蛋白胨      10g        KH2PO4   1.5g
酵母膏      3g         Na2HPO4  2 g
淀粉        3g         H2O     1000 ml
MgSO4·7H2O 0.1g       pH7.8
121℃， 15分钟
（2）将加热处理过的菌悬液稀释为10-3、10-4、10-5，分别取0.5mL接入无菌平板，倒入芽孢菌分离培养基，混匀，置于35℃，培养18～24小时。
    芽孢菌分离培养基如下：
    用营养琼脂培养基与70Bx麦芽汁培养基，溶化后以1:1的量混匀即成.
营养琼脂培养基配方为：
肉膏      3～5g       NaCl     5 g
蛋白胨    10 g        琼脂     15～20g
H2O       1000ml      pH       7.0～7.2
121℃，20分钟
（3）挑取单菌落作分离纯化培养：
    单菌落→液体培养基→菌悬液→划线分离，经数次重复，直至由单个细胞形成单独的菌落。